시료에 없는 큰 피크가 후반부에 나와요

전형적인 고스트 피크입니다. 원인은 시료가 아니라 물(수계 이동상) 쪽일 가능성이 높습니다.

물에 들어 있는 미량 유기물(TOC)은 농도가 아주 낮아도, 초기 조건에서 물을 오래 흘리는 동안 컬럼 앞부분에 계속 붙잡혀 쌓입니다. 그러다 그라디언트 후반에 유기용매 비율이 올라가면 그동안 모인 것이 한꺼번에 떨어져 나오면서 큰 피크로 보입니다.

컬럼을 바꿔도 몇 번 만에 재발한다는 게 이 해석과 맞습니다. 컬럼이 오염된 게 아니라 매번 새로 쌓이는 것이니까요.

줄이는 방법은 이렇습니다.

• 물 등급을 올리세요. LC 또는 LC-MS 등급 신품을 쓰고, 오래된 병은 과감히 버립니다. 정제수 장치를 쓴다면 필터·카트리지 교체 주기를 확인해보세요.
• 용매 라인과 병을 관리하세요. 수계 전용 라인과 병을 정해두고 주기적으로 교체합니다. 병 안쪽에 생긴 막이 원인인 경우도 있습니다.
• 세정을 루틴으로 만드세요. 매 런 끝에 고농도 유기용매로 씻고 초기 조건으로 복귀한 뒤 재평형하는 순서를 고정하면, 쌓이는 양 자체가 줄어듭니다.

완전히 없애기는 어렵습니다. 다만 크기를 목표 피크에 영향 없는 수준까지는 충분히 낮출 수 있습니다.

확인 방법도 하나 알려드리면, 주입을 아예 하지 않고 그라디언트만 돌려보세요(no-injection run). 그래도 그 피크가 나오면 이동상 기인이 거의 확실합니다.