인젝션 직후 베이스라인이 아래로 훅 꺼져요

연속 주입에서만 나타나고 첫 런은 괜찮다는 게 결정적인 단서입니다. 재평형이 덜 된 상태에서 다음 런이 시작되는 것으로 보입니다.

그라디언트가 끝나면 컬럼 안은 높은 유기용매 조성으로 채워져 있고, 이전 시료에서 늦게 나오는 성분도 아직 남아 있습니다. 이 상태에서 초기 조건으로 급히 돌아가 바로 주입하면, 컬럼 안 조성이 아직 초기값에 도달하지 못한 채로 분석이 시작됩니다. 그게 베이스라인이 꺼지는 것처럼 보이는 원인입니다.

런 사이클을 이렇게 잡아보세요.

1. 고농도 유기용매 세정 — 그라디언트 끝에서 높은 %B를 일정 시간 유지해 남은 성분을 확실히 빼냅니다.
2. 초기 조건으로 복귀
3. 충분한 재평형 후 주입 — 최소 컬럼 부피의 5배, 여유가 있으면 10배까지 흘려주세요.

시퀀스를 짤 때 재평형 시간을 아끼려다 오히려 데이터를 버리는 경우가 많습니다. 초반이 불안정하면 적분 기준선을 매번 손봐야 해서 결국 시간이 더 듭니다.