UV 베이스라인이 계속 우상향으로 흘러요

그라디언트에서 베이스라인이 오르는 건 대부분 정상입니다. B용매(보통 아세토니트릴이나 메탄올)의 UV 흡광도가 A용매보다 높아서, B 비율이 올라가면 흡광도도 같이 올라가는 거예요.

특히 저파장(210~220nm)에서 심하게 나타납니다.

줄이는 방법은 두 가지예요. 하나는 A용매와 B용매의 흡광도 차이를 줄이는 것 — 물 쪽에도 같은 농도의 산(예: 0.1% 포름산)을 넣어서 조성을 맞춰주면 꽤 완화됩니다. 다른 하나는 검출 파장을 조금 올려보는 거고요.

용매 등급도 영향이 큽니다. HPLC 등급이라도 로트마다 차이가 있어서, 새 병 열었을 때 갑자기 심해졌다면 그쪽을 의심해볼 만합니다.